ESTUDIO MICROSCÓPICO DE
LAS BACTERIAS DEL YOGUR
1.- Observación de las
bacterias.
Preparar un porta bien limpio y con
una gota de agua. Coger una porción pequeña de yogur con
un palillo o una aguja enmangada y hacer una extensión sobre
el porta. Secar la extensión con mucho cuidado a la llama del
mechero.
Lavar la preparación con xilol
para que se desprenda de las gotas de grasa que posea y dejar que se
seque al aire. Añadir unas gotas de azul de metileno y dejar
que se coloree durante unos pocos minutos. Lavar después la preparación
con agua.
Depositar una gota de glicerina en
una zona adecuada del porta y colocar el cubre. Observar la preparación
a mediano y gran aumento, intentar reconocer los dos tipos principales
de bacterias lácticas y dibujar lo observado.
2.- Análisis de las bacterias
del yogur mediante tinción Gram.
Colocar una pequeña muestra
de yogur en un portaobjetos.
Extender la preparación y fijar a la llama.
Realizar una tinción de Gram:
mediante esta coloración se pueden diferenciar las bacterias
típicas del yogur (Lactobacillus bulgaricus, Streptococcus
thermophilus), que son Gram (+), de las bacterias Gram (-) como
los coliformes que no deben encontrarse en el yogur.
Contestar las siguientes preguntas:
1) El yogur es un alimento más
fácilmente digerible que la leche, ¿por qué?
2) Al determinar las bacterias del yogur por la técnica de
Gram, si aparecen bacterias Gram (-), ¿qué indica?
3) En casos de intolerancia a la lactosa, ¿qué alimento
será más fácilmente tolerado, la leche o el yogur?
¿Por qué?
ESTUDIO MICROSCÓPICO DE LA MITOSIS EN EL MERISTEMO RADICULAR DE CEBOLLA
1. Preparación del material biológico: raíz de la cebolla (Allium cepa)
Primero se coloca la cebolla sobre un frasco lleno de agua, de tal manera que la parte inferior del bulbo o suela se mantenga en contacto permanente con el nivel del frasco. Hay que evitar que se seque, manteniendo el nivel del agua. A los 2 o 3 días, a temperatura ambiente, las raíces habrán alcanzado unos tres cm. de longitud.
2. Elaboración de la preparación microscópica
Cuando la raíz ha alcanzado el tamaño adecuado, se corta la parte más fina y terminal (meristemo radicular) con una tijera de punta fina. El fragmento cortado debe tener una longitud de poco más de medio cm. para facilitar su manipulación.Se coloca el trozo de raíz dentro de un vidrio de reloj y se cubre con unas gotas de carmín acético. Se calienta el vidrio hasta que el colorante entra en ebullición y se mantiene durante 15 segundos. Transcurrido este tiempo se retira la raíz con unas pinzas y se coloca sobre el porta. Con un escalpelo se corta la extremidad de la raíz, dejando sólo un fragmento de unos 3 o 4 mm.
Por último, se deposita encima de la punta de la raíz un cubre y se presiona con la extremidad plana de un lápiz. A continuación se le añade una gota de carmín acético sobre el borde del cubre y se sigue presionando hasta que el colorante no impregne el tejido. Se intenta conseguir una monocapa de células meristemáticas.
3. Observación de las células mitóticas
Se pone la preparación en el microscopio y se observa al principio con aumento moderado. Se verán células dispersas por todo el campo de observación. Hay que distinguir tres tipos de células:
·
Células de menor tamaño, pero de grandes núcleos teñidos de rosa. Tienen citoplasma denso y están dispuestas en filas. Son las células meristemáticas, con gran actividad mitótica.
·
Células más grandes, alargadas y con núcleos más pequeños. Corresponden a células ya diferenciadas.
·
Células ovoideas, de núcleos pequeños, pero que se tiñen intensamente. Son las células de la cofia.
Se elige la zona de células meristemáticas y se observará a mayor aumento. Conviene escoger una región en que las células no se hayan teñido demasiado, y que los núcleos presentan los cromosomas de color rojo-violáceo sobre fondo sin pigmentar.
Hay que reconocer células meristemáticas en las distintas fases de la mitosis y realizar un dibujo, indicando el aumento, de cada una de ellas.
INVESTIGANDO LO QUE PRODUCE
LA CARIES
Material
- Portaobjetos y cubreobjetos.
- Palillos
- Microscopio con objetivo de
inmersión.
- Mechero de alcohol o de gas.
- Aceite de inmersión.
- Azul de metileno.
- Alcohol etílico.
- Agua del grifo.
- Xilol.
|
|
Procedimiento
Coger un portaobjetos, limpiarlo y desengrasarlo
con alcohol. Colocar en el centro del porta una gota de agua. Pasar
un palillo por la superficie de los dientes, tanto por la parte externa
como por la parte interna; mezclar el líquido que haya quedado
en el palillo con la gota de agua del porta y realizar una extensión.
Dejar que la preparación se seque
al aire y fijarla con la llama del mechero, pasándola por encima
de ésta dos o tres veces, y comprueba, tocándola con la
mano, que en ningún momento llegue a quemar. Cubrir toda la extensión
con azul de metileno y dejar actuar el colorante durante dos o tres
minutos. Limpiar la preparación con agua del grifo. Esperar a
que se seque, colocar el cubre y ya se puede observar al microscopio.
Si se quiere conseguir el máximo
aumento y observar la preparación con detalle, utilizar el objetivo
de inmersión siguiendo las siguientes instrucciones:
1) Enfocar la preparación con
el objetivo de menor aumento.
2) Colocar una gota de aceite de inmersión sobre el cubre y
poner el objetivo de inmersión enfocando con mucho cuidado.
3) Una vez acabada la observación, limpiar bien el objetivo
de inmersión con un paño apropiado o un papel de fumar.
4) Cuando sea necesario, utilizar un poco de xilol para poder disolver
bien el aceite.
Dibujar lo observado por el microscopio
e intentar reconocer diferentes tipos de bacterias (formas y agrupaciones).
Indicar el número de aumentos de la preparación.
OBSERVACIÓN DE CÉLULAS
EUCARIONTES
MATERIAL
- Microscopio
- Mechero
- Bisturí o tijeras de punta
fina
- Pinzas y/o palillos estériles
- Cebolla
- Papel de filtro
- Placa de Petri
- Frasco lavador
- Colorante (verde de metilo o azul
de metileno)
- Portas y cubres
PROCEDIMIENTO
A) Células vegetales (Epidermis
de cebolla)
- Se corta la cebolla por la mitad
y se separa una de las capas de la misma.
- Marca con el bisturí o con
las tijeras una cuadrícula de pequeño tamaño
(1 cm de lado) en la parte interna o cóncava de la capa.
- Separa el fragmento de epidermis
con las pinzas y colócalo en el centro del portaobjetos.
- Coloca el porta en la placa de Petri,
añade unas gotas de colorante sobre la muestra y déjalo
actuar durante cinco minutos.
- Lava con cuidado el exceso de colorante
y sécalo con un poco de papel de filtro.
- Añade una gota de agua a la
muestra.
- Coloca el cubre apoyándolo
por un lado y dejándolo caer para que no queden burbujas.
- Observa la preparación al
microscopio, utilizando varios objetivos, realiza un dibujo detallado
de las células e indica el aumento del mismo.
B) Células animales (Epitelio
de la mucosa bucal)
- Raspa suavemente el interior del
carrillo con las pinzas o con un palillo (siempre por la parte roma,
procurando no cortarse). Coloca la mucosa blanca que se obtiene en
el portaobjetos.
- Realiza una extensión (frotis)
deslizando el borde de un porta sobre el que tiene la muestra.
- Calienta suavemente con el mechero
(¡que no llegue a quemar!) la parte inferior
del porta que contiene la mucosa.
- El resto del procedimiento es idéntico
al de la epidermis de cebolla.
PRÁCTICA DE ORGANOGRAFÍA
VEGETAL
Las imágenes que se incluyen
en esta experiencia son de libros citados en la bibliografía
de prácticas.
